目的:制备高乌头生物碱纳米结构脂质载体(AAS-NLC)经皮给药系统，通过纳米脂质载体化学促渗作用与微针物理促透作用相结合有效提高药物的经皮吸收效率，并利用NLC的缓释性能降低药物对皮肤的刺激性及其他毒副作用。
方法:以高乌甲素和冉乌头碱含量为指标提取高乌头生物碱并对其基本理化性质进行考察;在单因素考察的基础上，采用均匀设计优化AAS-NLC的处方并对其进行表征;以固体脂质纳米粒(SLN)作为对照，通过人胚皮肤成纤维细胞（CCC-ESF-1）与人永生化表皮细胞(HaCaT)对NLC在细胞水平上的渗透性能进行评价，并通过体内外透皮实验对NLC的经皮渗透特性进行进一步研究;结合微针的物理促透作用考察NLC在皮肤中的穿透及递送行为，对AAS-NLC微针透皮给药系统中药物的大鼠体内药动学行为和抗大鼠佐剂型关节炎(AA)模型的药效学研究进行考察;并通过皮肤刺激性和心脏毒性实验对其安全性进行初步评价。
结果:优选的AAS最佳提取工艺为:90％乙醇，调pH=1，10倍溶剂用量，回流提取3次，提取得到的AAS具有一定亲脂性，在高温、高湿、强光照射条件下均较为稳定。采用高压均质法制得的AAS-NLC平均粒径为160.5士7.9 nm，Zeta电位为-24.8士1.6 mV，对高乌甲素（Lappacontine，LA）及冉乌头碱(Ranaconitine，RAN)的包封率分别为82.18％和81.87％;透射电镜显示NLC近球型，大小均匀;DSC和XRD结果表明，药物大部分以无定型状态存在;与物理混合物相比，NLC的体外累积释放率增大。细胞实验表明NLC和SLN对于皮肤细胞的生物相容性较为相似，且优于药物溶液组;HaCaT和CCC-ESF细胞对于NLC的细胞内吞作用主要与细胞膜膜穴脂筏相关，荧光标记物主要分布在细胞质中。纳米粒子跟踪分析结果证明纳米粒不能以完整形态穿透皮肤，但通过扫描电镜观察表明脂质材料可以改变皮肤角质层结构。体外透皮与在体微透析实验显示NLC系统对药物具有更好的促渗作用。微针与NLC相结合用于AAS的透皮给药，能显著提高LA和RAN的经皮渗透量，且激光共聚焦显微镜观察发现纳米粒可以通过微孔道向更深层的皮肤穿越。大鼠体内药动学结果表明AAS-NLC微针透皮给药系统提高了药物的生物利用度，能够维持较平稳的血药浓度。药效学实验发现AAS-NLC微针透皮给药系统能够更好地抑制AA大鼠的足趾肿胀程度，使AA大鼠血清中的炎症因子和疼痛因子显著降低，并有效调节免疫功能。AAS-NLC微针透皮给药系统对家兔皮肤没有明显刺激性，并能够减缓出现的心律失常现象。
结论:制备得到的NLC生物相容性较好，能改变皮肤角质层的通透性，是一种适合AAS经皮给药的纳米载体。通过微针的高效物理促透作用结合NLC的化学促渗作用，能够显著提高AAS的经皮渗透量和生物利用度，增强对大鼠佐剂型关节炎的抗炎镇痛和免疫调节作用。此外，通过AAS-NLC微针透皮给药系统能够有效降低药物的皮肤刺激性及心脏毒性，为微针结合脂质载体用于毒性中药经皮给药的应用开发带来新的发展机遇。
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