目的:本文以通天口服液为研究对象，采用间歇式皮下注射硝酸甘油致慢性偏头痛大鼠模型，以与通天口服液功能主治相关的抗血小板聚集为生物活性指标，研究指标成分与生物活性之间的量效关系，建立与通天口服液药效相关的HPLC定量指纹图谱，并将所建抗血小板聚集生物活性测定法应用于通天口服液负荷剂量给药合理性研究中，通过比较负荷剂量给药与常规给药对慢性偏头痛大鼠内源性物质及血小板聚集的影响，探明通天口服液负荷剂量给药临床应用的合理性，阐明其具体作用机制，为通天口服液的质量控制提供依据。
方法:通过优化色谱条件及系统的方法学考察，建立通天口服液的指纹图谱，对特征峰进行归属分析，并对不同批次通天口服液中5个成分进行HPLC定量分析。对抗血小板聚集试验进行单因素考察，建立抗血小板聚集生物活性测定法，并研究有效成分单体、有效成分单体不同配比及通天口服液与生物活性之间的量效关系。以间歇式皮下注射硝酸甘油的方式建立慢性偏头痛大鼠模型，并通过脑组织病理切片及内源性物质含量变化验证模型可靠性。采用抗血小板聚集生物活性测定法比较研究通天口服液不同给药方法对慢性偏头痛大鼠的影响，通过测定负荷剂量给药与常规给药对偏头痛大鼠体内5-HT、NO、NOs、CGRP含量及血小板聚集的影响，探明通天口服液负荷剂量给药的合理性。
结果:建立了通天口服液的HPLC定量指纹图谱，匹配确立了19了共有峰，并进行了归属及标定，其中5个共有峰分别为芍药苷、升麻素苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、洋川芎内酯Ⅰ;5个成分同步测定结果显示，10批次通天口服液中5个成分含量差异较大。建立了抗血小板聚集生物活性测定法，结果显示，洋川芎内酯Ⅰ为通天口服液抗血小板聚集的主要活性物质，洋川芎内酯Ⅰ、5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素苷在抗血小板聚集中呈协同作用，不同批次通天口服液抗血小板聚集活性不同，主要与通天口服液中洋川芎内酯Ⅰ、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷三者的总量相关。建立了慢性偏头痛动物模型，造模后，脑干及下丘脑中5-HT、NOs、CGRP含量显著下降，给予通天口服液治疗后明显上升，整个过程显示出慢性偏头痛反复发作的特点。负荷剂量给药可以显著降低模型大鼠体内血浆中5-HT、NO、NOs、CGRP的含量及血小板聚集率，并使其维持在正常水平，而常规给药组仅能在一定程度上降低模型大鼠体内血浆中5-HT、NO、NOs、CGRP的含量及血小板聚集率，不能恢复至正常水平。
结论:建立了通天口服液抗血小板聚集生物活性测定法，其中洋川芎内酯Ⅰ，5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素苷在抗血小板聚集活性中起协同作用，建立的间歇式皮下注射硝酸甘油致慢性偏头痛动物模型在一定程度上反映出偏头痛反复发作的特点，可用于慢性偏头痛治疗药物的作用机制研究;通天口服液负荷剂量给药可以通过调节慢性偏头痛大鼠血浆中5-HT、NO、NOs、CGRP的含量及血小板聚集率达到抑制硝酸甘油引起的慢性偏头痛，负荷剂量给药的方法较常规给药效果更好，为临床使用负荷剂量治疗偏头痛的合理性提供有力证据，也为质量控制提供一种有效的生物活性测定手段。
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