目的:研究千里光碱对原代培养小鼠肝细胞的毒性作用,并通过基因芯片分析初步探讨其肝毒性作用机制。寻找可能在千里光碱诱导肝细胞凋亡中发挥重要作用的信号分子,从而为进一步研究其诱导肝细胞凋亡的机理奠定基础。方法:千里光碱与原代培养小鼠肝细胞共孵育48小时观察其对肝细胞存活率的影响,通过DNA片段化电泳实验观察千里光碱诱导肝细胞凋亡的作用,随后运用细胞凋亡基因芯片检测千里光碱对凋亡相关基因表达的影响。依次用Trizol试剂提取总RNA、用紫外吸收测定法和变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量,用True Labeling-AMP线性RNA扩增试剂盒进行cDNA合成,标记和扩增后使用SuperArray ArrayGrade cRNA纯化试剂盒纯化。芯片杂交后进行化学发光检测,之后芯片图像通过X胶片和台式扫描仪获得。用GEArray表达分析配套软件(GEArray Expression Analysis Suite)进行完整的芯片数据分析。