目的:通过比较益气活血方介导对趋化因子5(CCL5)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)在破裂及非破裂型髓核细胞中表达的影响,探索益气活血方促进破裂型腰椎间盘突出后重吸收的机制。方法:收集破裂型与非破裂型腰椎间盘突出症患者的髓核组织各6例,采用酶消法分离细胞,放入含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养,定期用倒置相差显微镜观察细胞贴壁及生长情况。用10只3个月龄SD大鼠制备含药(益气活血方)血清及无药(生理盐水)血清,用两种血清分别培养破裂型及非破裂髓核细胞。提取两种血清体外给药后的破裂及非破裂原代髓核细胞RNA。利用实时荧光定量PCR(实时qPCR)技术分别检测体外含药血清给药培养后及非含药血清培养后的破裂及非破裂型髓核细胞中CCL5,TNF-α,IL-1βmRNA的表达,记录统计分析数据。提取含药血清及非含药血清体外给药培养后的破裂及非破裂型原代髓核细胞蛋白,利用免疫蛋白印迹(Western Blotting)技术分别检测两种血清体外给药培养后的破裂及非破裂型原代髓核细胞中CCL5,TNF-α及IL-1β蛋白的表达,记录统计分析数据。结果:CCL5,TNF-α及IL-1β在破裂型髓核中的表达明显高于非破裂型(P<0.05),在破裂型含药组髓核细胞中的表达显著高于无药组(P<0.05)。结论:益气活血方可提高促炎因子在破裂型髓核细胞中高表达,有利于髓核细胞的炎性反应,加速细胞外基质(ECM)的降解,从而有利于重吸收现象的发生,且破裂型髓核比非破裂型髓核更容易发生重吸收现象。
(8.0+极速模式)