目的:探讨加味六君子汤含药血清抑制人胃癌BGC-823细胞增殖的作用及机制。方法:①动物急性毒性试验验证该中药复方的安全性。②本研究采用中药血清药理学和体外细胞培养的实验方法，加味六君子汤含药血清组和盐水对照血清组，作用于胃癌BGC-823细胞24h后，通过倒置显微镜来观察细胞形态变化。③以加味六君子汤不同浓度含药血清和盐水对照血清分别培养BGC-823细胞不同时间后，以MTT检测对细胞增殖的影响，流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞的凋亡指数。@DNA-Ladder法检测细胞凋亡情况。⑤浓度为10％的加味六君子汤含药血清和10％盐水血清分别作用于BGC-823细胞24h后，Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白活性检测试剂盒检测Caspase-3,Caspase-8和Caspase-9蛋白活性。⑥RT-PCR检测两组细胞凋亡通路中相关因子Bax、Bcl-2基因的变化。⑦Western-blot检测凋亡通路中相关蛋白细胞色素C(Cyt.c)、Bax和Bcl-2表达的改变。
结果：①动物毒性急性实验证实该药口服安全无毒。②含药血清作用后的BGC-823细胞大量变圆和不规则，脱壁，胞浆有较多空泡，胞体变圆细胞间接触变松，细胞周围出现碎片，部分细胞漂浮在培养液中。③浓度为5％、10％、15％、20％、30％的含药血清作用于BGC-823细胞24h后与相同浓度的正常血清作用24h后相比较，在血清添加量为10％，就有明显的抑制细胞增殖的作用(P＜0.01)抑制率为39.2％，且其半数抑制率的药物血清浓度为14.5％。④浓度为10％、15％、20％的含药血清作用于BGC-823细胞24h后细胞凋亡率分别为(13.5+0.88)％、(18.6±0.60)％、和(33.0±0.58)％与对照组相同浓度空白血清的凋亡率(0.40±0.02)％、0.29±0.04)％和(0.18±0.03)％比较差异均有显著性(P＜0.01)，该复方含药血清可阻滞BGC-823细胞的细胞周期，使G2/M期细胞增多，S期细胞减少，但对药物浓度没有明显的依赖性。⑤Caspase凋亡试剂盒检测结果示CaSpase-3、Caspase-9蛋白被激活程度较高，而Caspase-8的激活程度与对照组相比，无显著差异;初步证明细胞凋亡是通过线粒体凋亡途径进行的。⑥RT-PCR检测到含药血清作用于细胞后与线粒体途径相关的Bcl-2基因下调，而BaX基因上调。⑦Western-blot进一步检测到对照组胞浆中Cyt.c蛋白几乎没有，加药组胞浆中Cyt.c蛋白明显增多;与对照组相比加药组中Bcl-2蛋白表达明显下降，而Bax蛋白显著升高，Bcl-2/Bax比值下降。
结论：加味六君子汤含药血清能诱导体外培养的人胃癌BGC-823细胞凋亡，其凋亡机制可能是通过线粒体凋亡途径进行的，该实验为临床上中药复方治疗胃癌提供了理论依据。
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