目的:研究中药丹参有效活性成分丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用及其调控COX-2对HCT-116细胞VEGF表达的影响.方法:利用MTT法检测不同浓度的TanⅡA对人结肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用,将pGL3-Basic-COX-2-promoter重组质粒和pRL-TK内参质粒共转染HCT-116细胞,分为空白组、对照组和TanⅡA组.药物作用48h后,双荧光素酶测定法检测COX-2启动子转录活性.将含COX-2CDS序列的pIRESI-COX-2重组质粒转染HCT-116细胞,分为空白组、对照组和TanⅡA组,ELISA法检测细胞培养液中VEGF的表达.结果:TanⅡA对人结肠癌HCT-116细胞有明显的增殖抑制作用,24、48、72h的IC50值分别为40.3μmol/L±5.22μmol/L,12.9μmol/L±3.24μmol/L,8.5μmol/L±1.47μmol/L,24h的最大无毒剂量为10μmol/L.转染pGL3-Basic-COX-2-promoter重组质粒48h后,COX-2启动子活性明显上调(对照组vs空白组,P<0.01),而不同浓度的TanⅡA可明显抑制COX-2启动子活性.转染pIRESI-COX-2重组质粒后,细胞培养液VEGF浓度升高(对照组vs空白组,P<0.05),而10μmol/LTanⅡA处理后,VEGF的表达显著下调(TanⅡA vs对照组,P<0.05).结论:TanⅡA能明显抑制人结直肠癌细胞增殖,并通过调控人结肠癌细胞COX-2表达抑制结直肠癌细胞VEGF的表达.
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