目的:评价健脾补肾解毒方治疗HBV携带者临床疗效及观察其对HBV携带者外周血中辅助性T淋巴细胞1(Th1)/辅助性T淋巴细胞2(Th2)相关细胞因子[白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)]的变化及对CD4+CD25+调节性T细胞的影响,初步探讨健脾补肾解毒方对HBV携带者的免疫调节作用。
方法:采用随机、对照的临床研究方法,选取2012年9月到2014年10月期间符合纳入标准的HBV携带者,随机分为治疗组与对照组,其中治疗组26例,对照组25例。治疗组口服健脾补肾解毒方,对照组口服安慰剂,每日1剂,分两次服用,疗程为24周。采集并分离两组患者治疗前及治疗后的外周血,用酶联吸附试验法(ELISA)检测Th1/Th2相关细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ)的变化及CD4+CD25+调节性T细胞的表达;用罗氏PCR仪检测乙肝病毒定量(HBV DNA)水平及采用美国ABBOT ARCHITECH CI2000SR定量分析仪检测HBsAg、HBeAg的滴度变化,用OLYMPUS AU2700自动生化分析仪检测肝功能(ALT、AST)等。
结果:
(1)健脾补肾解毒方治疗后肝功能指标ALT、AST分别为27.12±8.892、26.50±9.501(U/L),较治疗前均无显著变化(P>0.05),与对照组比较亦无显著性差异(P>0.05)。
(2)健脾补肾解毒方治疗后HBsAg滴度、HBeAg滴度、HBV DNA定量分别为4.2293、2.7061、7.5803(1g IU/ml),较治疗前下降(P<0.05),且HBsAg滴度与HBV DNA定量的下降值优于对照组(P<0.05);但在HBsAg、HBeAg及HBV DNA的阴转方面,两组间比较无明显差异(P>0.05)。
(3)健脾补肾解毒方治疗后Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2分别为19.90、96.55(pg/ml),与治疗前相比呈上升趋势(P<0.05),且IFN-γ升高效果明显(P<0.05); Th2型细胞因子IL-10为17.121±7.2521(pg/ml),与治疗前相比呈降低趋势(P<0.05),而IL-4两组均呈上升趋势(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。
(4)健脾补肾解毒方治疗后CD4+CD25+Tregs为1.5515(ng/ml),较对照组2.2370(ng/ml),呈明显下降趋势,其差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:
(1)健脾补肾解毒方有一定抑制血清HBV DNA复制、降低HBsAg、HBeAg滴度的作用。
(2)健脾补肾解毒方可增强Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ)的表达,控制Th2型细胞因子(IL-10)的表达,上调Th1/Th2细胞的比例,并可以降低CD4+CD25+Tregs活性。
(3)健脾补肾解毒方对HBV携带者Th1/Th2细胞因子表达的一定调节作用,可能是其发挥疗效的机制之一。