首页 / 院系成果 / 成果详情页

基于线粒体凋亡途径探讨白屈菜红碱抗肿瘤作用的机制  学位论文  

  • 编号:
    73f85488-d73b-47c4-80b3-809b97b7d94c
  • 作者:
    韩聪
  • 学位授予单位:
    上海中医药大学
  • 作者单位:
  • 导师:
    朱国福
  • 学位:
    硕士
  • 学位授予年份:
    2016
  • 论文答辩日期:
    3000/1/1
  • 中文关键词:
    白屈菜红碱;线粒体;凋亡途径;抗肿瘤作用;
  • 摘要:

    目的:观察白屈菜红碱(chelerythrine,CHE)的抗肿瘤作用,并通过线粒体凋亡途径研究其作用机制。
      方法:
      1.MTT法观察白屈菜红碱对体外培养的人肝癌细胞Hep3B、HepG2、人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞Mcf-7等肿瘤细胞增殖的影响。
      2.细胞平板克隆实验观察白屈菜红碱对体外培养的人肝癌细胞Hep3B集落形成的影响。
      3.Hoechst33258染色法观察白屈菜红碱对体外培养的人肝癌细胞Hep3B凋亡形态改变的影响
      4.流式细胞术、PI单染法观察白屈菜红碱对体外培养的人肝癌细胞Hep3B凋亡率的影响。
      5.Real-time PCR法检测白屈菜红碱对体外培养的人肝癌细胞Hep3B凋亡通路上Bcl-2、Bax、Bcl-xl mRNA表达水平的影响。
      6.Western blot法检测白屈菜红碱对体外培养的人肝癌细胞Hep3B凋亡通路上Bcl-2、Bax、Bcl-xl蛋白表达水平的影响。
      7.膜电位检测、线粒体中及细胞浆中细胞色素C的检测、Caspase-9及Caspase-3蛋白含量检测等方法探讨对体外培养的人肝癌细胞Hep3B凋亡线粒体途径的影响。
      8.建立人肝癌细胞Hep3B裸鼠移植瘤模型,考察白屈菜红碱在体内的抗肿瘤作用。
      结果:
      1.白屈菜红碱能抑制体外培养的人肝癌、肺癌、乳腺癌等细胞的增殖作用,且呈明显的量效依赖关系;其中对人肝癌细胞Hep3B抑制作用较强。
      2.白屈菜红碱能显著抑制体外培养的人肝癌细胞Hep3B集落的形成。
      3.在Hoechst33258细胞形态学实验中,可以在白屈菜红碱组观察到体外培养的人肝癌细胞Hep3B凋亡的特征性变化。
      4.在PI流式实验中,观察到白屈菜红碱可以诱导体外培养的人肝癌细胞Hep3B的凋亡。
      5.在Real-time PCR实验中,白屈菜红碱可以使体外培养的人肝癌细胞Hep3B中Bcl-2、Bcl-xl mRNA的表达降低,Bax mRNA的表达升高,与对照组比较,差异有统计学意义。
      6.通过Western blot实验,白屈菜红碱可以使体外培养的人肝癌细胞Hep3B中Bcl-2、Bcl-xl蛋白的表达降低,Bax蛋白的表达升高,与对照组比较,差异有统计学意义。
      7.通过线粒体途径相关的实验可以看出,白屈菜红碱使体外培养的人肝癌细胞Hep3B中线粒体膜电位下降,细胞浆中细胞色素C增多、线粒体中减少;Caspase-9及Caspase-3蛋白的表达升高。
      8.体内实验表明,白屈菜红碱可以抑制裸鼠移植瘤的生长。
      结论:
      1.白屈菜红碱在体外能抑制多种肿瘤细胞的增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡有关
      2.在进一步研究中,白屈菜红碱可能通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。
      3.白屈菜红碱在体内也可以抑制肿瘤的生长。

    收起
浏览次数:1 下载次数:0
浏览次数:1
下载次数:0
打印次数:0
浏览器支持: Google Chrome   火狐   360浏览器极速模式(8.0+极速模式) 
返回顶部