目的:基于中药复方的非酒精性脂肪肝临床诊疗数据，中药复方与检验指标的动态变化进行关联和建立药物指标调节网络，寻找真实世界中医药治疗非酒精性脂肪肝有效用药的共性规律;利用网络药理学方法在分子网络调控背景中探讨经方苓桂术甘汤治疗脂肪肝的作用靶点及其所调控的信号通路并进行实验验证研究。
方法:①收集临床处方和检验指标数据并清理，建立564例患者4216张处方及298味中药与25个相关检验指标的关联策略，检验指标前后时间窗的处方用药强度标准化;建立指标疗效判定的策略方案，重要指标相关的差异药物及其对其它指标的调节网络，基于整个方药数据库建立药物配伍网络，应用BK算法发现相应的基本方，再采用富集分析法考察各基本方与不同检验指标的关联。同时对脂肪肝临床疗效确切的经方苓桂术甘汤的四味中药与检验指标进行关联分析。②通过TCMID中药数据库并以化学专业数据库的中药和有效成分数据库来辅助检索查询苓桂术甘汤的中药活性成分及其链接的靶标基因，并以STITCH数据库再次验证;通过GenCard、OMIM数据库检索得到脂肪肝疾病靶标基因信息。两者均根据HGNC数据库和UniProt数据库明确规范和统一靶标的基因编码和蛋白编码的唯一性。获得的靶标蛋白信息各自导入STRING数据库背景网络提取出中药成分靶标蛋白网络，寻找共享基因蛋白并通过基因富集分析预测共同调控的信号通路并设计针对共享基因的实验验证研究。
结果:①根据自拟指标疗效判定方案表明与19个高偏指标相关联的60味中药具有正相关性，49味中药具有负相关性;调低效应相关的5个基本方，调高效应相关的3个基本方，形成各自调节网络;苓桂术甘汤四味中药可能与VLDL、DBIL、A/G、AST等检验指标形成调节网络。②检出苓桂术甘汤4味中药活性成分75个，靶标基因469个，构建了中药活性成分靶标网络;检出脂肪肝疾病靶标基因195个，构建了脂肪肝疾病靶标网络。基因富集分析得到信号通路,共同调控的110个，共享基因80个。非酒精性脂肪肝病(NAFLD)信号通路相关共享基因包括:PIK3R3、PPARA、AKT1、IL1B、CYP2E1、JUN、IRS1、INS、PIK3CA、MAPK8、IRS2、RELA。苓桂术甘汤能够显著降低NAFL模型大鼠肝组织PPARA和UCP2 mRNA表达并增加ACOX1 mRNA表达。
结论:建立了将真实临床信息如检验指标与处方用药动态变化相关联的方法，解决了药物使用强度处理分析临床上方药调整所带来的困难，挖掘形成了治疗非酒精性脂肪肝临床用药基本方及其方药对检验指标调节网络;可为临床无证可辨但检验指标异常患者提供用药参考，同时为从临床中筛选有效处方提供指导。通过网络药理学相关数据库检索，在人类全基因组背景网络中构建了苓桂术甘汤中药活性成分-靶标基因-靶标蛋白-靶标基因-脂肪肝疾病的分子网络;通过基因富集分析方法预测苓桂术甘汤治疗脂肪肝作用机理，得到共同调控信号通路包括非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、胰岛素等。实验验证苓桂术甘汤对NAFL模型大鼠肝组织共享基因UCP2、PPARA、ACOX1 mRNA表达明显改善，为本课题的靶标预测研究方法的可靠性获得实证性科学依据。
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