目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌TKT表达的调控差异,以及TKT在人肝癌细胞增殖中的作用.方法:1)采用DEN诱发大鼠肝癌,分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗后,Affymetrix rat 230A GeneChip arrays检测肝癌组织TKT表达的差异;2)设计3个人TKT基因siRNA序列,将siRNA经脂质体转入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测细胞生长增殖情况、Realtime-PCR检测该基因的表达差异.结果:1)芯片结果显示,TKT基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,不同中医治法对其具有不同程度的下调作用,其中健脾理气法下调作用较明显;2)采用MTT法筛选到1个TKT基因RNA干扰有效靶序列,转染48h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制(与阴性对照组相比,P＜0.01);3)实时荧光定量PCR检测表明,转染48h后该基因的表达明显降低.结论:TKT基因的高表达与肝癌细胞恶性增殖有关,而中药健脾理气治法对其具有下调作用.
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