目的:建立自身免疫性肝炎(AIH)小鼠模型,观察"补虚化瘀法"方药对AIH模型小鼠生化指标、肝脏组织学及Treg/Th17细胞数量和功能的影响,探究Treg/Th17细胞异常在AIH发病中的调控作用及"补虚化瘀"方药治疗AIH的作用机制。方法:雄性4-6周龄C57/BL6小鼠60只,分为正常空白组、模型组、西药组、补虚化瘀法组方的中药低剂量组、补虚化瘀法组方的中药中剂量组、补虚化瘀法组方的中药高剂量组(每组各10只)。各药物干预组预先给药7天,第7天采用α-Galcer腹腔注射(2ug/10g)遣模,其中西药组造模前以强的松灌胃(0.12mg/只/天),中药组分别以人正常剂量每天所需的生药量的10、20、40倍灌胃,模型组、空白组予等体积生理盐水灌胃,灌胃1次/天,造模10～12小时后眼球采血取组织,分别检测各组的肝功能、病理改善情况;流式细胞技术检测各组肝组织中Treg细胞(CD4+CD25+Foxp3+)及Th17细胞(CD3+CD4+IL-17+IFN-γ)的数量;Elisa法检测各组肝组织中Treg、Th17细胞相关细胞因子的表达(IL-10、IL-17);实时荧光定量PCR(Real-timeQ PCR)、Western-blot技术检测肝脏中两种特异性转录因子Foxp3、ROR-γtmRNA及蛋白的表达。结果:经α-Galcer造模后，C57BL/6小鼠病理显示为1-2级即轻到中度的界面性炎症;且西药组与模型组比较肝损害程度减轻，且炎性细胞浸润缓解，具有统计学差异(P<0.05)。小鼠肝组织淋巴细胞中Treg细胞含量空白组>中药组>西药组>模型组(P<0.05),Th17细胞含量模型组>中药组>西药组>空白组(P<0.05);Treg/Th17细胞比例空白组>中药组>西药组>模型组(P<0.05)。TGF-β1含量空白组>中药组>模型组(P<0.05)，但治疗后各组之间无差异(P>0.05);IL-10含量空白组>中药组>西药组>模型组(P<0.05);IL-17含量模型组>西药组>中药组>空白组(P<0.05)。Foxp3mRNA表达空白组>模型组(P<0.05)，但治疗后无差异(P>0.05);RORγt mRNA水平模型组>中药组>西药组>空白组(P<0.05)。Foxp3蛋白表达空白组>中药组>西药组>模型组(P<0.05, P<0.01)。 RORγt蛋白表达模型组>中药组>西药组>空白组( P<0.05)，但治疗后各组之间无差异(P＞0.05)。结论:Treg/Th17细胞免疫调控的异常在AIH的发病机制中起着重要的作用。“补虚化瘀法”方药可显著提高肝组织Foxp3表达，降低RORγt表达，从而调节Treg、Th17细胞发育和增殖，从而对恢复Treg/Th17细胞平衡起到调节作用，进而对AIH起到有效治疗作用。
(8.0+极速模式)