[1]上海中医药大学附属普陀医院呼吸内科
目的以16 HBE人支气管上皮细胞株为研究对象,通过体外研究探讨芪仙汤提取物对哮喘气道上皮间质转化的影响。方法将16HBE细胞加入不同浓度的H_2O_2及芪仙汤提取物干预不同时间。观察细胞形态改变; CCK-8检测H_2O_2对16HBE细胞活力的影响; RT-PCR检测E-cadherin、α-SMA基因表达水平; Western blot检测E-cadherin、α-SMA蛋白表达水平;免疫荧光检测E-cadherin,α-SMA蛋白表达水平及蛋白定位。结果 H_2O_2作用后细胞形态呈EMT改变,而芪仙汤提取物可逆转细胞EMT改变;CCK-8结果显示,H_2O_2作用后气道上皮细胞存活率随浓度增加而降低(P<0.01),芪仙汤提取物可以减少H_2O_2诱导的气道上皮细胞损伤(P<0.01)。RT-PCR检测结果示,H_2O_2刺激后气道上皮细胞E-cadherin mRNA水平显著降低(P<0.01),α-SMA mRNA水平增高(P<0.05),芪仙汤提取物作用后可以逆转H_2O_2诱导的E-cadherin转录水平降低(P<0.05),抑制H_2O_2诱导的α-SMA mRNA表达水平增加(P<0.05)。Western blot及免疫荧光检测结果示E-cadherin、α-SMA蛋白表达水平与基因表达水平相一致(P<0.05)。结论芪仙汤提取物可以减少氧化应激诱导的气道上皮细胞损伤及气道上皮间质转化。
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