目的探讨细胞外超氧化物歧化酶DNA(EC-DNA)甲基化水平改变在动脉粥样硬化发病中的作用。方法 16只Apo E-/-小鼠(Apo E-/-组)给予高脂饲料喂养,16只C57BL/6小鼠(WT组)给予不含任何高脂成分的普通饲料喂养,分别于喂养第8、12、16和20周检测小鼠血脂、主动脉组织形态及丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测主动脉组织细胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)、DNMT1 m RNA水平,巢式甲基化特异性聚合酶链反应检测主动脉组织EC-SOD DNA甲基化程度。将THP-1诱导为巨噬细胞,分为3组:空白对照组(NC组)、空白质粒组(p EGFP-N1组)和重组质粒组(p EGFP-N1-DNMT1组),NC组用不做任何处理,继续培养,p EGFP-N1组加入10μl脂质体Lipofectamine和20μg空质粒载体p EGFP-N1,p EGFP-N1-DNMT1组加入10μl脂质体Lipofectamine和20μg p EGFP-N1-DNMT1重组质粒载体,培养24 h后检测细胞EC-SOD、DNMT1蛋白表达和EC-SOD DNA甲基化程度。结果第8、12、16和20周,Apo E-/-组TC、LDL、TG呈升高趋势,HDL无明显变化;各时段Apo E-/-组TC、LDL、TG、HDL与WT组比较,差异有统计学意义(P<0.05),TC、LDL、TG高于WT组,HDL低于WT组。第16和20周,WT组动脉组织内皮细胞结构规则有序,Apo E-/-组主动脉内膜明显增厚并伴炎症浸润。第8、12、16及20周,Apo E-/-组MDA、ROS呈升高趋势,各时段Apo E-/-组MDA、ROS高于WT组。Apo E-/-组EC-SOD m RNA表达水平、DNMT1 m RNA表达水平和EC-SOD甲基化水平与WT组比较,差异有统计学意义(P<0.05),EC-SOD m RNA表达水平低于WT组,DNMT1 m RNA表达水平和EC-SOD甲基化水平高于WT组。p EGFP-N1-DNMT1组DNMT1蛋白表达、EC-SOD甲基化水平及EC-SOD蛋白表达水平与p EGFP-N1组和NC组比较,差异有统计学意义(P<0.05),p EGFP-N1-DNMT1组DNMT1蛋白表达、EC-SOD甲基化水平高于p EGFP-N1组和NC组,EC-SOD...
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