两种玄参属植物化学成分及其抗炎活性研究  学位论文  

玄参科(Scrophulariaceae)玄参属(Scrophularia L.)植物全世界有约200种，为多年生草本或半灌木状草本，主要分布于中亚、欧洲(地中海地区)、北美洲，中国分布有36个种。其生长环境多样化，包括高山、森林、河畔，甚至少数品种(S.deserti Delile)生长在热带沙漠。多种玄参属植物在世界范围内一直被作为传统药物，其拉丁名就来自淋巴结核(scrofula)。本论文目的就是研究该属的化学成分并进行抗炎活性研究，探讨其药理和临床应用的物质基础，以及它们在植物化学分类学上的意义。
　　齿叶玄参(S.dentata Royle ex Benth.)是《中华本草》(藏药卷)唯一收录的西藏地区玄参属植物，全草入药，在藏医药中作为叶兴巴的上品使用，主要用于治疗天花，麻疹等高热瘟疫症及中毒症。本论文采用现代天然药物研究方法，对齿叶玄参的化学成分研究，旨在为该药材的进一步临床应用、质量标准制定和资源开发提供详实的化学和药理学信息。
　　本论文利用溶剂分步萃取法和多种分离材料和分离技术，从齿叶玄参全草95％乙醇提取物的乙酸乙酯部位分离得到45个化合物，并应用理化及波谱分析方法鉴定了这些化合物的结构，分别为：正三十一炕和正三十三炕的混合物(1)，Irgafos168(2)，菠菜甾醇(3)，β-谷甾醇(4)，2-三十三烷酮(5)、2-(4-hydroxyphen-yl)-ethyl 1-dodecyloctadecanoate(6)，芹菜素(Apigenin，7)，金圣草黄素(Chrysoeriol，8)，12，15-hydroxy-19(4→3)abeo-abieta-4(18)，8，11，13-tetraen-7-one(9)，杜仲树脂酚(Medioresinol，10)，丁香脂素(Syringaresinol，11)，diacetylmanynoside(12)，2-O-trans-feruloylrhamnopymnose(13)，3-0-trans-feruloylrhamnopymnose(14)，Scropoli-oside D(15)，Z-harpagoside(16)，E-harpagoside(17)，Acteoside(18)，Lateroside(19)，Scropoloside B(20)，6-(2，3-diacetyl-4-trans-3，4-Dimethoxycinnamoyl)rhamnosyl cata-Ipol(21)，6-(2，3-diacetyl-4-cis-3，4-Dimethoxycinnamoyl)rhamnosyl cataipol(22)，Scr-opoloside B(23)，Z-Scropoloside B(24)，Scorodioside(25)，6-O-α-L-(4″-O-trans-cinn-amoyl)rhamnopyranosylcatalpol(26)，Lipedosides A-I(27)，(E，Z)-Martynoside(28，29)，Lagotisoside D(30)，Osmanthuside B(31)，6'-menthiafoloylharpagide(32)，6′-menthiafoloylharpagide(33)，8-O-acetylharpagide(34)，7-deoxygardoside(35)，Ajugoside or Leonuride(36)，8-Epideoxyloganic acid(37)，6′-O-p-coumaroyl-harpagide(38)，10-deoxygeniposidic acid(39)，Geniposidic acid(40)，Ajugol(41)，Harpagide(42)，Isoacteoside(43)，Mimengoside A(44)，Mimengoside B(45)。其中化合物9、13、14、21、22、24、32、33为未见文献报道的新化合物，化合物1、5、6、7、8、10、11、12、19、26、31、35、37、38、39和40为首次从玄参属植物中分离得到，化合物2可能是来自塑料制品的抗氧剂，其他化合物均为首次从该种植物中分离得到。
　　玄参(Radix S.Ningpoensis)为玄参科植物玄参S.ningpoensis Hemsl.的干燥根，为常用传统中药。该品种自1963版《中国药典》开始被历版药典收录，用于热入营血，温毒发斑，热病伤阴，舌绛烦渴，津伤便秘，骨蒸劳嗽，目赤，咽痛，白喉，瘰疬，痈肿疮毒。近十年来，文献报道玄参属植物的抗炎作用是其药理十要研究方向，但其作用机理研究仍存在较大差异，甚至有的自相矛盾。本研究在借鉴Park等研究方法的基础上，在分了水平上探讨了玄参的主要成分哈帕苷和哈帕酯苷β-葡萄糖苷酶水解产物的结构及其抗炎作用和机理。
　　通过大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等多种现代色谱分离于段，从浙玄参70％乙醇提取物中快速高效地制备了克级的哈帕苷和哈帕酯苷，并分离得到另外5个苷类化合物。通过理化常数测定、波谱测定分析等方法，鉴定了其结构分别为：哈帕苷(1a)、2-(3-hydroxy-4-methoxypheny1)ethyl O-α-arabinopyranosyl-(1→6)-O-α-rhamnopyranosyl-(1→3)-O-β-glucopyranosi-de(2a)、2-(3-hydroxy-4-methoXyphenyl)ethyl O-α-rhamnopyranosyl-(1→3)-O-β-glu-copyranoside(3a)、2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethyl O-α-arabinopyranosyl-(1→6)-β-glueopyranoside(4a)、安格洛苷C(5a)、哈帕酯苷(6a)、3β-O-(β-D-xylopyran-osyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→3)]-β-D-fucopyranos-yl-11，13(18)diene-olean-23α，28 diol(7a)。其中化合物7a为未见文献报道的新化合物，化合物3a、4a为首次从该属植物中分离得到。
　　体外抗炎活性筛选表明，1a和6a对COX-1/2、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放、NO生成没有抑制作用；而它们的β-葡萄糖苷酶水解产物是相同的H.harpagide(8a)，则显示了一定的抑制COX-2的作用，通过光谱数据分析，H-harpagide是水解产物不稳定的半缩醛结构打开形成的双醛基新化合物，在结构上其与PGE等前列腺素类相似，通过分子模拟和对接计算，发现H-harpagide可以有效的结合于COX-2酶的活性区域，从而达到抑制COX-2酶活性的目的。