癌症是世界各国中引起死亡的主要原因之一。在发展中国家，宫颈癌是诊断率最高的女性癌症，全球每年会有530000新增案例。在中国，宫颈癌的发生率占世界新发生率的28％，使得其在女性中成为致死率最高的癌症。宫颈癌的五年生存率约为55％。目前中国治疗宫颈癌的手段主要是发化疗。因此，寻找选择性高，有效率高，毒性较低的新型抗肿瘤药物十分迫切。
天然化合物一直是药物的主要来源之一。藤黄属(Garcinia L.)植物在我国有21种，主要分布于广东，广西，云南等南部省区。传统中药材藤黄(gamboge)来源于藤黄(G.hanburyi)的树脂，具有消肿攻毒、止血杀虫功效，自古以来用于治疗痈疽肿毒、顽藓恶疮和外出血等症。xanthone类化合物是藤黄属植物的主要成分之一。在前期工作中，我们从怒江藤黄叶子中分离得到xanthone类化合物Nujiangexanthone A(NJXA)，并发现其对多种肿瘤细胞都显示出抗肿瘤活性。
hnRNPK作为RNAbinding蛋白复合体家族的一员，可以和多种RNA结合在一起，影响细胞RNA的加工和转运。目前，hnRNPK在肿瘤发生、发展及治疗中的功能尚不十分明确。近期研究报道显示，多种癌症细胞，例如:鳞状细胞癌，结肠癌，鼻咽癌等都高表达hnRNPK。我们的前期工作显示NJXA可以明显降低宫颈癌细胞株中hnRNPK蛋白的表达，我们会进一步利用多种生物学手段阐明NJXA对宫颈癌细胞的作用机制。
目的:研究NJXA抑制肿瘤生长的作用机制，为抗肿瘤药物的研发提供科学依据。
方法:运用MTT法发现NJXA对宫颈癌细胞(HeLa)具有较强的抑制作用，进一步应用细胞生物学、生物化学、分子生物学及生物显微成像等技术阐明NJXA抑制宫颈癌细胞的体外作用机制。
结果:NJXA是从藤黄属植物怒江藤黄的叶子中分离出的xanthone类化合物。MTT实验结果显示，NJXA在10μM的剂量下明显的抑制宫颈癌细胞(HeLa)的生长。克隆形成实验显示NJXA呈剂量和时间依赖地抑制宫颈癌细胞克隆体形成。流式细胞分析显示NJXA能造成HeLa细胞株G0/G1期细胞周期阻滞。WB实验检测细胞G1期相关蛋白，发现JNXA可以明显降低Cyclin A，Cyclin E1和CDK家族蛋白的表达。此外，荧光照片显示NJXA可以诱导HeLa细胞线粒体形态的片段化、膜电位紊乱及DNA片段化现象，证明其可以诱导线粒体依赖的细胞凋亡。我们还通过蛋白质组学实验，发现NJXA显著下调了hnRNPK蛋白的表达。为了探索hnRNPK的功能，我们用小干扰RNA通过质粒转染入HeLa细胞降低hnRNPK的表达，发现hnRNPK蛋白表达降低后，与NJXA处理结果相似，均可以降低Cyclin A，Cyclin E1和CDK家族蛋白的表达，同时激活凋亡家族相关蛋白，并且可以整体减缓宫颈癌细胞的细胞周期。
结论: NJXA通过下调hnRNPK蛋白的表达，引起宫颈癌细胞周期阻滞和诱导线粒体依赖的细胞凋亡。
(8.0+极速模式)