目的通过静脉注射循环纤维细胞,证明该细胞参与兔耳增生性瘢痕的发生、发展过程,探讨其在增生性瘢痕形成中所起的作用及影响。方法取直系同窝GFP阳性的兔血并分离出单核细胞,经流式细胞仪分选出循环纤维细胞,并通过耳缘静脉注入另一只直系同窝GFP阴性兔中,然后在直系同窝转基因GFP阴性兔耳上制作增生性瘢痕模型。实验组分别在3、7、10、14、21、28 d时间点取兔耳创面组织和增生性瘢痕标本组织;对照组取每个时间点阴性兔耳伤口旁的正常兔耳皮肤组织。将瘢痕标本制作冰冻切片,在激光共聚焦荧光显微镜下观察组织内GFP绿色荧光,以及免疫组织化学荧光双重染色(CD34、CD45)。结果实验组中,GFP荧光阴性兔耳3、7、10、14、21、28 d获取的创面组织和增生性瘢痕中,可检测到来自GFP荧光阳性兔耳的循环纤维细胞;对照组中兔耳的正常皮肤检测显示,该细胞呈阴性。结论来自外周血的循环纤维细胞迁移至伤口,即逐渐从伤口肉芽组织迁移至伤口表面并参与形成增生性瘢痕这一过程,可作为研究增生性瘢痕形成机制的重要研究方向。
(8.0+极速模式)