[目的]探索并论证验方“芩部丹”是否能够活化自噬及其对该过程中相关miRNA的调节作用。通过检测与自噬相关的miRNA与mRNA及自噬相关蛋白LC3的表达情况的变化，阐明构成“芩部丹”的三种中药单体对巨噬细胞自噬产生的影响及其在miRNA水平可能存在的调节机制。为进一步深入研究“芩部丹”的药理机制提供了理论基础。
[方法]①设空白对照组、阳性对照组、用药组，分别在细胞培养后不同时间点收集细胞，采用RT-PCR法检测自噬相关基因Atg5、Atg7、Atg12、Beclin1mRNA的表达水平。②设空白对照组、阳性对照组、DMSO组、用药组，并在培养后不同时间内收集细胞，采用Western-Blot法及AO染色法观察自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达水平和酸性囊泡的数量。③设空白对照组、用药组，在药物作用细胞后12h收集细胞，采用miRNA测序法检测巨噬细胞自噬相关miRNA的表达水平。④设空白对照组、用药组，于药物作用细胞后12h收集细胞，采用基因表达谱测序法检测巨噬细胞自噬相关mRNA的表达水平。
[结果]①RT-PCR方法检测各组不同时间点(6h、12h、24 h)的Atg5、Atg7、Atg12、Beclin1 mRNA表达，结果显示用药组mRNA表达水平上调显著。②Western-Blot方法检测各组不同时间点(6h、12h、24h)的自噬相关蛋白LC3表达水平，结果显示与对照组相比，12h的差异最为显著。③AO染色结果支持①、②两项的数据。④经“芩部丹”三种中药单体作用于巨噬细胞不同时间点后，选定12h为研究药物单体对巨噬细胞内自噬通路影响的最佳作用时间点。与空白对照组相比，黄芩苷、对叶百部碱、丹参多酚酸B三种单体处理组的自噬相关miRNA改变显著。⑤巨噬细胞经黄芩苷、对叶百部碱、丹参多酚酸B三种单体处理组12 h后，与空白对照组相比，对叶百部碱组和丹酚酸B组细胞mRNA表达谱也发生了显著变化，但黄芩苷组改变不显著。
[结论]“芩部丹”可能通过对miRNA的调节作用而发挥其对自噬基因表达的影响作用，进而发挥其临床的治疗作用。
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