目的:建立高专属性和高灵敏度的果聚糖测定方法。方法:以麦冬多糖(PRO)为模型多糖,利用高效凝胶过滤色谱(HPGPC)-柱后荧光衍生的方法来测定该多糖。通过对柱前和柱后因素的全面考察,提高方法的灵敏度。结果:PRO柱后先经水解再荧光衍生(方法1)或进样前用过碘酸氧化PRO(方法2)均可使方法灵敏度较直接柱后衍生提高约40倍。方法1的最佳测定条件:水解反应温度和pH值分别为150℃和1.3;衍生反应温度和pH值分别为90℃和12.2。方法2的最佳测定条件:过碘酸氧化时间≥24h;衍生反应温度和pH值分别为80℃和12.4。在2.5～160μg/mL浓度范围内两种方法的线性关系均较好(r=0.9995～0.9996,n=7),检测限均为25ng,低、中、高3种浓度的日内RSD分别≤3.2%和≤4.0%,日间RSD分别≤4.3%和≤4.6%。结论:本文所述的两种方法均可用于微量果聚糖的测定。
(8.0+极速模式)