目的:研究腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚时心肌力学和肌浆网钙转运的病理特征;探讨β-肾上腺素能受体信号转导通路的调控作用,以及中药坎离颗粒对肥厚心肌力学及肌浆网钙转运异常的影响及其可能机制。
方法：用腹主动脉缩窄法制备雄性Wistar大鼠心肌肥厚模型,分为模型组、坎离颗粒组、缬沙坦组和坎离颗粒+缬沙坦联合干预组,另设假手术组。术后1周开始给药干预,分别给予KanLi6.75g/kg(坎离颗粒组)、Valsartan7.2mg/kg(缬沙坦组)、KanLi6.75g/kg+Valsartan7.2mg/kg(联合干预组)灌胃,连续32周。32周时在体大鼠血流动力学测定法记录各组大鼠中心动脉压和心功能等血流动力学指标,离体状态下测定大鼠左室乳头肌张力静增现象及对ISO、Forskolin、不同钙浓度灌流液的张力反应。进一步以Indo-1法检测各组大鼠心肌肌浆网钙摄取和释放功能,定磷法测定SERCA2a的活性,免疫组化法测定心肌β-1受体密度,Westernblotting法分别测定左室心肌组织SERCA2a、PLB、NCX及RyR2蛋白含量。
结果：(1)血流动力学变化:与假手术组相比,模型组大鼠LVSP和LVEDP均显著升高(P＜0.05),±LVdp/dtmax有加大趋势,但未显示统计学差异。坎离颗粒组的LVEDP(P＜0.05)较假手术组显著降低,但对LVSP仅显示有降低趋势;缬沙坦组LVSP和LVEDP较模型组明显降低(P＜0.05);联合干预组LVSP(P＜0.05)和LVEDP(P＜0.01)较模型组显著降低。各药物干预组大鼠±LVdp/dtmax的绝对数值均低于模型组,差异无显著性;(2)乳头肌张力变化:①发展张力(DF)-在异丙肾上腺素激动下,模型组大鼠离体乳头肌DF(P＜0.05)、-dF/dt(P＜0.05)的增幅均较假手术组明显提高,坎离组大鼠乳头肌DF(P＜0.01)、+dF/dt(P＜0.01)以及-dF/dt(P＜0.01)的增幅均明显低于模型组动物,缬沙坦的DF、+dF/dt以及-dF/dt坎离颗粒组NCX蛋白表达高于模型组;缬沙坦组则低于模型组;联合治疗组和模型组接近。④模型组心肌组织RYR2蛋白表达低于假手术组;坎离颗粒组、缬沙坦组、联合治疗组均高于模型组;且表达水平相似。(8)心肌细胞β1-AR密度变化:模型组大鼠心肌细胞β1-AR密度较假手术显著增加(P＜0.01),坎离颗粒组、缬沙坦组以及联合治疗组心肌β1-AR密度均较模型组显著降低(P＜0.01)。
结论：压力负荷超载性心肌肥厚大鼠的心脏左室舒张功能不全,存在心肌力学损害和SR钙转运异常,其机制与压力负荷超载时β-AR信号转导通路代偿性上调有关。中药坎离颗粒干预可改善心室舒张功能,通过抑制β-AR信号转导通路异常激活和改善SR关键钙转运调节蛋白的表达而增强SR钙摄取可能是其重要药效机制。
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