高乌头为毛茛科乌头属植物高乌头Aconitum Sinomontanum Nakai干燥根，主产于我国西部及中部，具有温中止痛，散寒燥湿的作用，民间用来治疗风寒关节冷痛或麻木瘫痪、跌打损伤、风湿、急慢性细菌性痢疾等。高乌甲素(Lappacontine，LA)是从高乌头中得到的一种二萜生物碱，是高乌头中的主要化学成分。临床主要使用LA的氢溴酸盐(Lappacontine Hydrobromide，LAH)，其水溶性好，便于使用。近年来，LAH的研究一直都比较活跃，研究发现LAH具有镇痛、麻醉、抗炎、解热等作用，尤其作为我国首创的非成瘾性镇痛药，临床上广泛用于癌痛和各种手术后中度以上疼痛的治疗，能够代替阿片类药物，减缓癌症病人的疼痛，并少有阿片类药物所带来的呼吸抑制和成瘾症。目前，对于高乌头中其他化学成分的研究、LA及其主要代谢产物含量测定方法的研究、组织分布以及LA的镇痛机理方面的研究都相对较少，有待于完善。基于LA具有较好的市场应用前景，本课题利用先进的分离纯化技术分离制备了高乌头中的化学成分，进一步完善了对该植物中二萜类生物碱及其它类型化合物的认识;利用UPLC-MS技术建立了同时测定LA及其代谢产物在大鼠各组织中含量的方法，并探究了LA在体内的镇痛机制，为今后的科研和临床应用提供了科学依据。
1.为了完善对该植物中化学成分的认识，本研究利用先进的柱色谱分离技术（HSCCC，大孔树脂，凝胶，ODS C-18，RP-HPLC，中性氧化铝等）分离制备单体成分，并利用NMR，OD，MS等技术对这些化合物的结构进行鉴定。目前，从该植物中已鉴定了19个化合物（16个是二萜类生物碱），其中7个为新化合物，分别为化合物1(sinoranaconitine A)，化合物2(sinoranaconitine B)，化合物3(sinomontanineK)，化合物4（sinomontanine L），化合物5（sinomontanine M），化合物6(ranaconidine)，化合物7(N-(chloromethyl)taspine);6个化合物为首次从该植物中发现，分别为化合物8（N-deacetylfinaconitine），化合物9(N-deacetylranaconitine)，化合物10(akirine)，化合物11(ranaconine)，化合物12（ benzethonium chloride），化合物13(N,N-dimethyl-N-(phenylmethyl)-Benzenemethanaminium)。
2.为完善LA及其代谢产物的含量测定方法、组织分布情况，以及探究LA的镇痛机制，本研究首次利用UPLC-MS建立了同时定量LA和其主要代谢物去乙酰高乌甲素(NLA)的方法，该方法线性范围为1-3000 ng/mL，准确性、精密度和基质效应均在15％的要求范围内。并利用该方法对这两个化合物的组织分布进行了考察，从而初步阐明了LA的镇痛机制。结果表明，LA具有较好的血脑屏障通透性，首先分布到大鼠脑组织，再代谢为NLA，最后在中枢系统起到镇痛作用。
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